Изучено влияние сокультивирования внеклеточных везикул фолликулярной жидкости молодых женщин и старшего репродуктивного возраста на показатели подвижности сперматозоидов. Везикулы получены методом дифференциального центрифугирования. Фракцию сперматозоидов выделяли из семенной жидкости 18 пациентов в возрасте 28-36 лет. Инкубация сперматозоидов с везикулами проводилась в соотношении 1:2 при 37°С в СО₂-инкубаторе в течение 60 или 120 мин. В качестве параллельного контроля использовали фракцию сперматозоидов без добавления везикул. После инкубации часть образцов сперматозоидов осаждали центрифугированием и фиксировали в 2.5% глутаровом альдегиде для анализа с помощью трансмиссионной электронной микроскопии. РНК из образцов везикул выделяли колоночным способом с последующим синтезом на ней кДНК в реакционной смеси в соответствии с протоколом miScript II RT Kit (Qiagen). После 60 мин инкубации с везикулами фолликулярной жидкости женщин старшего репродуктивного возраста незначительно изменялись показатели подвижности и гиперактивации сперматозоидов по сравнению с таковыми при инкубации с везикулами фолликулярной жидкости женщин молодого возраста и с контролем. Профили миРНК фолликулярной жидкости женщин различался, что позволяет предположить разный функциональный состав и влияние везикул фолликулярной жидкости женщин разных возрастных групп на характеристики сперматозоидов. С помощью трансмиссионной электронной микроскопии показаны различия взаимодействия везикул фолликулярной жидкости женщин разных возрастных групп со сперматозоидами. Дальнейшее изучение внеклеточных везикул фолликулярной жидкости, анализ их транскриптомного, протеомного и метаболомного состава, влияния на подвижность и оплодотворяющую способность сперматозоидов позволит повысить эффективность программ вспомогательных репродуктивных технологий с мужским фактором бесплодия.

The effect of co-cultivation of extracellular vesicles in the follicular fluid of young women and women of advanced maternal age on sperm motility was studied. Vesicles were obtained by differential centrifugation. The fraction of sperm was isolated from the seminal fluid of 18 patients aged 28-36 years. Incubation of spermatozoa with vesicles was carried out in a ratio of 1:2 at 37°C in a CO₂ incubator for 60 or 120 minutes. As a control group there was a fraction of spermatozoa without vesicles addition. After incubation sperm samples were sedimented by centrifugation and fixed in 2.5% glutaraldehyde and analyzed by transmission electron microscopy. RNA was isolated from follicular fluid vesicles by column method followed by cDNA synthesis on it in a reaction mixture according to miScript II RT Kit protocol (Qiagen). After 60 minutes of incubation with follicular fluid extracellular vesicles of women of advanced maternal age, the indicators of motility and hyperactivation of sperm slightly changed, in comparison with the group where incubation was performed with follicular fluid vesicles from young women and control group. Follicular fluid miRNA profiles of women of different ages varied, which makes it possible to assume a different functional composition and the effect of follicular fluid vesicles of different age groups on the characteristics of sperm. Using transmission electron microscopy, differences in the interaction of follicular fluid vesicles of different age groups with spermatozoa were shown. Further study of the effect of follicular fluid extracellular vesicles, and transcriptomic, proteomic and metabolomic composition on the mobility and fertilizing ability of sperm will increase the effectiveness of assisted reproductive technology programs in patients with male infertility.