Активация и миграция Т-клеток трансплантата к целевым органам реципиента — важнейший механизм патогенеза реакции "трансплантат против хозяина" (РТПХ). Хорошо известна роль моноцитарного хемоаттрактантного протеина-1 (МСР-1/CCL2) и его рецептора CCR2 в рекрутировании Т-клеток во время иммунной и/или воспалительной реакции. Для выяснения механизма терапевтического действия мезенхимных стволовых клеток (МСК) костного мозга при РТПХ исследовали способность этих клеток влиять на миграцию активированных донорских Т-клеток через функциональную ось CCL2-CCR2 in vitro. МСК выделяли из костного мозга здоровых доноров. После сокультивирования активированных с помощью IL-2 Т-клеток и аллогенных МСК в разных пропорциях определяли уровень CCL2 в супернатантах и экспрессию CCR2 на поверхности CD4⁺/CD8⁺ Т-клеток, используя твердофазный ИФА и проточную цитометрию соответственно. Кроме того, с помощью системы Transwell оценивали влияние МСК на миграцию активированных Т-клеток в присутствии CCL2 или без него. После сов­местного культивирования уровни CCL2 в супернатантах были достоверно выше, чем после изолированного культивирования МСК, причём степень увеличения зависела от доли МСК в культуре клеток. МСК ингибировали пролиферацию Т-клеток, но не изменяли процентное содержание подмножеств CD4⁺ и CD8⁺ Т-клеток. При этом МСК оказались способны повышать экспрессию CCR2 в подмножестве CD8⁺-клеток, но не в подмножестве CD4⁺-клеток. МСК усиливали миграцию IL-2-активированных Т-клеток к хемоаттрактантному белку CCL2 благодаря увеличению экспрессии CCR2. В целом полученные данные свидетельствуют о том, что МСК могут усиливать хемотаксис цитокинактивированных Т-клеток in vitro через функциональную ось CCL2-CCR2.

Donor T-cell activation and migration to the host target organs are very critical players in the pathogenesis of GVHD. Role of monocyte chemoattractant protein (CCL2) and its receptor CCR2 in T cells recruitment during immune or inflammatory response is also well known. The present study was designed to determine whether human bone marrow derived-mesenchymal stem cells (BM-MSCs) can affect activated T cells migration through the CCL2-CCR2 axis in vitro, so as to understand the underlying therapeutic mechanism of MSCs in GVHD. MSCs were expanded from mononuclear cells separated from healthy donors' bone marrows. After IL2-activated T cells co-cultured with allogeneic MSCs at different ratios, CCL2 levels in supernatants were measured by ELISA method, and CCR2 expressions in CD4⁺/CD8⁺ T cells subsets were detected by flow cytometry. Also, the effect of MSCs on the migration of activated T cells was investigated in the absence or presence of CCL2 using the transwell methods. Our results show that CCL2 levels in supernatants of co-cultured system were significantly higher than that of MSCs alone, and the degree of increment was MSCs dose-dependent. MSCs obviously inhibit the proliferation of T cells, but not change the percentages of CD4⁺ and CD8⁺ T cells subsets. MSCs can up-regulate the CCR2 expressions in CD8⁺ subsets rather than CD4⁺ subsets; MSCs enhanced IL-2-activated T cells migration to CCL2 by improving CCR2 expression. The data demonstrate that MSCs can enhance the chemotaxis of cytokine activated T cells through the CCL2-CCR2 axis in vitro.