Оценивали влияние внеклеточных везикул фолликулярной жидкости на морфофункциональные характеристики сперматозоидов человека с помощью аналитической системы CASA. Везикулы были получены методом последовательного центрифугирования при разных скоростях вращения и заморожены при -80ºС в среде Sydney IVF Gamete Buffer. Фракцию сперматозоидов выделяли из семенной жидкости 21 пациента в возрасте 27-36 лет дифференциальным центрифугированием в градиенте плотности. Осадок суспензировали в среде Sydney IVF Gamete Buffer для достижения концентрации 10⁶/мл и инкубировали с везикулами (1:2) при 37ºС в СО₂-инкубаторе в течение 30 и 60 мин. В качестве параллельного контроля использовали фракцию сперматозоидов без добавления везикул. После инкубации часть образцов сперматозоидов осаждали центрифугированием при 700g 5 мин и фиксировали в 2.5% глутаровом альдегиде на 0.1 М буфере для анализа с помощью трансмиссионной электронной микроскопии. После 30 и 60 мин инкубации улучшались показатели прогрессивной и общей подвижности сперматозоидов. Достоверных изменений криволинейной и линейной скорости сперматозоидов не наблюдалось. Инкубация с везикулами значительно изменяла траекторию движения сперматозоидов, что может говорить об увеличении их гиперактивации и, возможно, оплодотворяющей способности. Дальнейшее изучение влияния внеклеточных везикул фолликулярной жидкости на подвижность сперматозоидов позволит повысить эффективность программ вспомогательных репродуктивных технологий с мужским фактором бесплодия за счёт улучшения характеристик спермы у пациентов с астенозооспермией и увеличения оплодотворяющей способности сперматозоидов.

In this study we evaluate follicular fluid extracellular vesicles effect on the morphofunctional characteristics of human spermatozoa using the analytical system CASA. Extracellular vesicles were isolated by differential centrifugation and freezed at -80^oC in Sydney IVF Gamete Buffer. Sperm cell fraction was isolated from semen samples (obtained from 21 patients at age of 27-36) by differential centrifugation in density cushion. The resulting pellet was suspended in Sydney IVF Gamete Buffer for reaching the concentration to 10⁶/ml and then was incubated with vesicles (1:2) at 37^oC in CO₂-incubator for 30 and 60 min. At the same time spermatozoa were incubated in the saline without adding extracellular vesicles as a control. After the incubation some of the sperm samples were precipitated by centrifugation at 700g for 5 min and fixed in 2.5% glutaraldehyde in 0.1 M buffer for analysis by transmission electron microscopy. After 30 and 60 min of incubation total and progressive motility of spermatozoa were increased. When we were analyzing the data of curvilinear and straight line velocity, no statistically significant differences were found. Incubation with vesicles has shown significant spermatozoa pathway change, which could increase spermatozoa hyperactivation and, possibly, fertilization ability. Further study of how follicular fluid extracellular vesicles effects the sperm motility improvement may increase effectiveness of assisted reproductive technology programs.