Сравнительные количественные исследования фокусов gH2AX, образующихся в фибробластах лёгкого человека, инкубированных в средах, содержащих меченный тритием тимидин или аминокислоты
С.М.Роднева1, А.А.Осипов1,2, Д.В.Гурьев1,2, А.А.Цишнатти1, Ю.А.Федотов1,2, Е.И.Яшкина1, Н.Ю.Воробьева1,2, А.А.Максимов1, О.А.Кочетков1, А.Н.Осипов1,2 - 166-170
1ФГБУ ГНЦ РФ — Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И.Бурназяна ФМБА России, Москва; 2ФГБУН Федеральный исследовательский центр химической физики им. Н.Н.Семёнова РАН, Москва, РФ
Проведены сравнительные исследования образования фокусов gН2АХ (маркера двунитевых разрывов ДНК) в фибробластах лёгкого эмбриона человека (линия MRC-5) при их 24-часовой инкубации в среде, содержавшей 3Н-меченные тимидин или аминокислоты (глицин, аланин, пролин) с удельной радиоактивностью от 100 до 400 МБк/л. Выявлена линейная зависимость изменения количества фокусов gH2AX от удельной радиоактивности среды. Показано, что количественный выход двунитевых разрывов ДНК при воздействии 3Н-тимидина более чем в 2 раза выше, чем при воздействии 3Н-меченных аминокислот. При сравнительном анализе выхода двунитевых разрывов ДНК при инкубации клеток с 3Н-меченными аминокислотами установлено, что 3Н-аланин вызывает наиболее значимый эффект по сравнению с 3Н-пролином, что согласуется с данными по содержанию их нерадиоактивных аналогов в белках хроматина.
Ключевые слова: γH2AX; MRC-5; тритий; 3H-тимидин; 3H-аминокислоты
Адрес для корреспонденции: denis.guryev@gmail.com Гурьев Д.В.
DOI: 10.47056/1814-3490-2021-3-166-170
Comparative investigations of the γH2AX foci forming in human lung fibroblasts incubated in media containing tritium-labeled thymidine or amino acids
S. M. Rodneva1, A. A. Osipov1,2, D. V. Gur'ev1,2, A. A. Tsishnatti1, Yu. А. Fedotov1,2, E. I. Yashkina1, N. Yu. Vorob'eva1,2, A. A. Maximov1, O. A. Kochetkov1, and A. N. Osipov1,2
1A. I. Burnazyan Federal Medical Biophysical Center, Federal Medical-Biological Agency, Moscow, Russia; 2N. N. Semenov Federal Research Center of Chemical Physics, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia
In present work we carried out comparative studies of γH2AX foci formation (a marker of DNA double-strand breaks (DSBs)) in human lung fibroblasts (MRC-5 line) during their incubation for 24 h in a medium containing 3H-labeled thymidine or amino acids (glycine, alanine, proline) with specific radioactivity from 100 to 400 MBq/l. A linear dependence of the change in the number of γH2AX foci on the specific radioactivity of the medium was revealed. It has been shown that the quantitative yield of DNA DSBs under the influence of 3H-thymidine is more than 2 times higher than under the influence of 3H-labeled amino acids. A comparative analysis of the DNA DSBs yields during incubation of cells with 3H-labeled amino acids revealed that 3H-alanine causes the most significant effect compared to 3H-proline, which is consistent with the data on the content of their non-radioactive analogs in chromatin proteins.
Key Words: γH2AX; MRC-5; tritium; 3H-thymidine; 3H-amino acids