Реализация терапевтического потенциала пуповинных МСК при болезни Крона путём регулирования содержания и функциональной активности Th17-лимфоцитов
Воспалительные заболевания кишечника, включая болезнь Крона и язвенный колит, являются хроническими и рецидивирующими иммунопатологиями, в которых активную роль играют Th17-лимфоциты. В современной стратегии лечения болезни Крона особую роль в иммунологических процессах отводят матриксу пуповины человека (вартонову студню). Выделяли и культивировали первичные пуповинные мезенхимные стромальные клетки (МСК) здоровых доноров, которые фенотипировали и идентифицировали с помощью проточной цитометрии, а также анализировали возможности их дифференцировки в адипогенном, остеогенном и хондрогенном направлении. С помощью проточной цитометрии анализировали содержание CD8CD17A+ Т-лимфоцитов и CD3+ Т-клеток в пуле мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) пациентов с осложнёнными свищами (N=11) и у здоровых доноров (N=14) как при изолированном, так и совместном культивировании с пуповинными МСК здоровых доноров. Пролиферацию Т-клеток оценивали путём окрашивания CFSE. Среди МКПК наблюдался повышенный по сравнению с нормой уровень CD8CD17A+ Т-лимфоцитов, который снижался в результате сокультивирования с пуповинными МСК. Сокультивирование этих клеток повышало эффективность Т-клеток пациентов путём снижения в них доли CD3+ Т-клеток и ингибирования их пролиферации. Предположено, что терапия пациентов с болезнью Крона с помощью пуповинных МСК будет препятствовать повышению уровня CD8CD17A+ Т-клеток и функциональной деградации Т-лимфоцитов.
jj15189737443@126.com Jin J
10.47056/1814-3490-2021-4-255-260
Therapeutic potential of umbilical cord-MSCs in Crohn's disease by regulating Th17 lymphocytes proportion and function
Inflammatory bowel disease, including Crohn's disease and ulcerative colitis, is a chronic and relapsing autoimmune disorder, which Th17 lymphocytes have been demonstrated being involved. In the recent treatment strategy of Crohn's disease, human umbilical cord matrix (Wharton's jelly, W, J) has been reported to be immune privileged. In this study, primary ulcerative colitis MSCs were isolated and cultured for further treatment, then immunophenotype and functional features of ulcerative colitis MSCs were identified by flow cytometric analysis and Adipogenesis, osteogenesis and chondrogenesis assays. 11 patients with complex fistulizing (Crohn's disease) and 14 healthy volunteers' PBMCs, CD8CD17A+ T lymphocytes and CD3+ T cells proportion were analyzed by flow cytometry compared with or without ulcerative colitis MSCs co-culturing. Moreover, T cells proliferation were performed by CFSE staining. In Crohn's disease patients PBMCs, there is an elevation of CD8-CD17A+ T lymphocytes than in heathy controls, however, ulcerative colitis MSCs treatment could decreased Th17 proportion in Crohn's disease patients PBMCs. Additionally, ulcerative colitis MSCs coculture with Crohn's disease patients PBMCs improved T cells function of Crohn's disease patients, including CD3+ T cells level and T cells proliferation. These results suggested that ulcerative colitis MSCs treatment could alleviate CD8CD17A+ T lymphocytes elevation in Crohn's disease patients and modulating T cells dysfunctions, which implies that ulcerative colitis MSCs might be a promise hoping strategy for Crohn's disease patients.