Содержание и архив номеров
2020 г., № 3 СЕНТЯБРЬ
Оценка химиочувствительности клеток увеальной меланомы ex vivo
Была получена первичная клеточная культура увеальной меланомы и оценена её лекарственная устойчивость к химиопрепаратам по метаболической активности клеток (МТТ-тест). Из 20 образцов только в 7 случаях удалось получить первичные культуры, пролиферировавшие в количестве, необходимом для постановки МТТ-теста. Однако и эти образцы не переживали 4-й пассаж, накапливали меланин и уходили в апоптоз. Ретинола пальмитат и непафенак не оказывали цитотоксического действия на клетки увеальной меланомы. Вальпроат натрия (конвулекс) не оказывал выраженного цитотоксического действия на 1 из 5 исследованных культур (UM4), в 2 из 5 культур 50% клеток погибли при использовании самой низкой концентрации препарата (1.88 мг/мл), ещё в двух культурах — при использовании концентрации 7-10 мг/мл. Цитотоксический эффект треосульфана удалось оценить только на четырёх культурах, но во всех случаях он оказал противоопухолевое действие, при этом в двух случаях был эффективен в концентрации 0.16 мг/мл. В концентрации 2.5 мг/мл гемцитабин оказывал выраженный цитотоксический эффект на 4 из 7 культур (гибель 70-80% клеток) и вызывал гибель приблизительно 45% клеток в оставшихся культурах. Митоксантрон оказывал противоположный эффект: в 2 из 5 культур в высоких концентрациях стимулировал рост, однако в 3 случаях даже в минимальной концентрации приводил к гибели 70-80% клеток.
Ключевые слова: увеальная меланома; химиотерапия; клеточная культура; МТТ-тест
Адрес для корреспонденции: alextsygankov1986@yandex.ru Цыганков А.Ю.
DOI: 10.47056/1814-3490-2020-3-185-190
Assessment of uveal melanoma cells chemosensitivity ex vivo
Aim. An attempt to create a primary cell culture of uveal melanoma (UM) and the evaluation of drug resistance to chemotherapy. Material and methods. The study included 20 patients aged 39-71 years (53.2±7.7) with UM. The height of the tumor was from 5.3 to 12.9 (9.1±2.2) mm, the diameter of the base of the tumor was from 8.9 to 18.4 (15.8±5.7) mm. In all cases, enucleation was performed. Tumor tissue samples were taken to obtain a cell culture, followed by a study of drug resistance and metabolic activity of cells (MTT assay). Results. from 20 samples of UM, only in 7 cases it was possible to obtain primary cultures, which proliferated in the amount necessary for the MTT assay. However, the last samples did not survive the 4th passage, accumulated melanin and went into apoptosis. Retinol palmitate and Nepafenac did not exert a cytotoxic effect on UM cells. Sodium valproate (Convulex) did not have a pronounced cytotoxic effect on 1 of the 5 studied cultures of UM (UM4), in 2 out of 5 cultures, 50% of the cells died at the lowest concentration of 1.88 mg/ml, and in 2 of 5 UM at a concentration of 7-10 mg/ml. The cytotoxic effect of threosulfan was evaluated only in 4 cultures of UM, but it had an antitumor effect on all cultures, and in 2 cases it was effective at a concentration of 0.16 mg/ml. At a concentration of 2.5 mg/ml, gemcitabine had a pronounced cytotoxic effect in 4 out of 7 cultures (death of 70-80% of the cells) and resulted in the death of approximately 45% of the cells in the remaining 3 cultures. Mitoxantrone had the opposite effect on cultures: in 2 out of 5 cases at high concentrations, it stimulated their growth, but in 3 out of 5 cases, even at a minimum concentration, 70-80% of the cells died. Conclusion. In the present work, an attempt was made to create a primary cell culture of UM and to perform an MTT assay. For a more detailed assessment of the chemosensitivity of primary UM melanomas, further studies are needed.
Key Words: uveal melanoma; chemotherapy; cell culture; MTT test