Функциональная активность непролиферирующих мезенхимных стромальных клеток, культивируемых в различной плотности
М.И.Ездакова1, К.В.Зорникова1, С.В.Буравков2, Е.Р.Андреева1 - 247-254
1ГНЦ РФ — Институт медико-биологических проблем РАН, Москва; 2Факультет фундаментальной медицины МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ
Исследовали состояние внутриклеточных компартментов и продукцию цитокинов в мезенхимных стромальных клетках (МСК) в зависимости от плотности культивирования. Клеточные деления останавливали митомицином С и высевали клетки плотностью 300-7000/см2. При низкой плотности культивирования в МСК были в 2 раза выше уровни трансмембранного потенциала митохондрий (MitoTracker Red) и эндогенных АФК (СМ-H2DCFDA), менее закислен лизосомальный компартмент (LysoTracker Green DND26), а также увеличена продукция иммунорегуляторных и ангиогенных медиаторов: VEGF, ИЛ-6, ИЛ-8, МСР-1, TGF-β. Сделано предположение, что изменение плотности культивирования может быть эффективным инструментом фенотипической поляризации МСК, обеспечивая направленное изменение их свойств.
Ключевые слова: мультипотентные стромальные клетки; митомицин С; плотность культивирования; внутриклеточные компартменты; паракринные медиаторы
Адрес для корреспонденции: andreeva@gmail.com Андреева Е.Р.
DOI: 10.47056/1814-3490-2020-4-247-254
Functional activity of non-proliferating mesenchymal stromal cells cultivated at different densities
M. I. Ezdakova1, K. V. Zornikova1, S. V. Buravkov2, and E. R. Andreeva1
1State Scientific Center of the Russian Federation — Institute of Biomedical Problems of the Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia; 2Faculty of Fundamental Medicine, M. V. Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia
The state of intracellular compartments and the production of soluble mediators in MSCs depending on the culture density were characterized. MSCs were growth-arrested with mitomycin C and seeded at a density of 300-7000 cell/cm2. MSCs at low density had 2 fold higher levels of transmembrane mitochondrial potential (Mito Tracker Red) and endogenous ROS (H2DCFDA), lysosomal compartments were less acidified (Lysotracker Green DND26), immunoregulatory and angiogenic mediators VEGF, IL-6,-8, MSR-1, TGFb were elevated. It was assumed that cultivation density can be an effective tool for MSC phenotypic polarization, providing a directional changes of their properties.
Key Words: multipotent mesenchymal stromal cells; mytomicin C; culture density; intracellular compartments; paracrine mediators