Влияние условий хранения на сохранность микровезикул мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток пупочного канатика человека
Исследовано влияние условий хранения на сохранность микровезикул, продуцируемых в кондиционированную среду культурой мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток ткани пупочного канатика человека. Установлено, что микровезикулы могут без существенных потерь храниться до 1 нед при 4оС, но практически полностью разрушаются при замораживании-оттаивании независимо от температуры хранения в замороженном состоянии (-20оС, -70оС или -196оС). Сходные результаты получены при анализе лиофилизированной кондиционированной среды мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток ткани пупочного канатика человека. Добавление криопротектора (5-10% ДМСО) и последующее программное замораживание и/или лиофилизация позволяет повысить долю сохранных микровезикул практически до исходного уровня. Полученные данные свидетельствуют о том, что, являясь мембранными образованиями, в процессе замораживания микровезикулы “ведут себя” так же, как и живые клетки, и требуют соответствующих условий подготовки к хранению.
romanov@cryocenter.ru Романов Ю.А.
Effect of storage conditions on the integrity of human umbilical cord mesenchymal stromal cell-derived microvesicles
We studied the effect of storage conditions on the safety of microvesicles produced by human multipotent umbilical cord mesenchymal stromal cells into the conditioned medium. It was found that microvesicles can be stored without serious degradation for up to 1 week at 4ºС, but were almost completely destroyed during freezing and thawing cycles irrespective of the storage temperatures (-20ºС, -70ºС, or -196ºС). Similar results were obtained for lyophilized medium conditioned by human multipotent umbilical cord mesenchymal stromal cells. Addition of a cryoprotectant (5-10% DMSO) followed by freezing and/or lyophilization preserved microvesicles at a nearly initial level. These findings indicate that during storage, microvesicles, being membrane structures, behave similar to living cells and require appropriate conditions for prolonged storage.