Метод интравитальной микроскопии широко применяется для исследования механизмов канцерогенеза in vivo, а также ответа на противоопухолевую терапию. Для визуализации опухолевых клеток с помощью интравитальной микроскопии используют клеточные линии, экспрессирующие флюоресцентные белки. Экспрессия экзогенных белков может влиять на скорость роста клеток и их туморогенность, поэтому для адекватного моделирования опухолевого микроокружения необходим анализ морфофункциональных свойств трансдуцированных клеточных линий. Методом лентивирусной трансдукции было получено 6 опухолевых линий мыши, экспрессирующих зеленый или красный флюоресцентный белок. Анализ морфологии, скорости роста и чувствительности к химиотерапии in vitro не выявил существенных различий между исходными и трансдуцированными линиями. Включение генов флюоресцентных белков в геном клеток 4T1 (рак молочной железы мыши) и B16-F10 (меланома мыши) не влияло на скорость роста опухолей после подкожного введения животным, однако клетки опухоли толстой кишки мыши CT26-GFP и CT26-RFP отторгались начиная с 8-х суток после имплантации. Изучение механизмов отторжения клеток линий СТ26-GFP/RFP позволит модифицировать методику транcдукции для получения моделей опухолевого микроокружения, доступных для визуализации in vivo. Трансдуцированные клеточные линии 4Т1 и B16-F10 могут применяться для изучения опухолевых клеток, сосудов и субпопуляций лейкоцитов методом интравитальной микроскопии.

Intravital microscopy is widely used for in vivo studies of the mechanisms of carcinogenesis and response to antitumor therapy. For visualization of tumor cells in vivo, cell lines expressing fluorescent proteins are needed. Expression of exogenous proteins can affect cell growth rate and their tumorigenic potential. Therefore, comprehensive analysis of the morphofunctional properties of transduced cells is required for creating appropriate models of tumor microenvironment. In the present study, six lines of mouse tumor cells expressing green and red fluorescent proteins were derived. Analysis of cells morphology, growth kinetics, and response to chemotherapy in vitro revealed no significant differences between wild-type and transduced cell lines. Introduction of fluorescent proteins into the genome of 4T1 (murine breast cancer) and B16-F10 (murine melanoma) cells did not affect tumor growth rate after subcutaneous implantation to mice, while both CT26-GFP and CT26-RFP cells (murine colon cancer) were rejected starting from day 8 after implantation. Elucidation of the mechanisms underlying CT26-GFP/RFP rejection is required to modify transduction technique for creating the models of tumor microenvironment accessible for in vivo visualization. Transduced 4T1 and B16-F10 cell lines can be used for intravital microscopic imaging of tumor cells, neoplastic vasculature, and leukocyte subpopulations.