Биолюминесцентная оценка распределения в мозге высокомолекулярной белковой фракции препарата “Целлекс-дейли” при интраназальном введении
В эксперименте на здоровых крысах оценивали проницаемость гематоэнцефалического барьера для белковой фракции 50-100 кД (БФ50-100) препарата “Целлекс-дейли”, меченной флюоресцентным трейсером FITC, при интраназальном введении по сравнению с раствором неконъюгированного красителя FITC. Флюори­метрический анализ образцов сыворотки крови и ликвора показал, что БФ50-100-FITC препарата “Целлекс-дейли” при интраназальном введении проникает в системный кровоток и цероброспинальную жидкость с максимумом накопления к 2 ч после введения и сохраняется в кровотоке в течение 24 ч, что, вероятно, обусловлено связыванием с белками плазмы крови. Различия в кинетическом профиле БФ50-100-FITC и свободного FITC косвенно подтверждают, что в течение 24 ч большая часть препарата не подвергается деградации, и FITC, вероятно, не отщепляется от белковых компонентов препарата. Анализ in vivo флюоресценции позволил заключить, что через 6 ч после окончания интраназального введения флюоресцентный сигнал достоверно определяется в обонятельных луковицах головного мозга, что свидетельствует о проникновении интраназально введенного препарата “в обход” гематоэнцефалического барьера. Сканирующая лазерная конфокальная микроскопия на срезах головного мозга крыс подтвердила факт проникновения высокомолекулярной белковой фракции БФ50-100-FITC в структуры ЦНС. Наиболее выраженное накопление меченого препарата наблюдалось в обонятельных луковицах через 6 и 12 ч после введения. В отличие от свободного FITC, вводимого в контрольной группе, препарат БФ50-100-FITC достоверно накапливался в обонятельной коре и нейронах фронтальной коры головного мозга с функционально полноценными ядрами, которые определялись через 6, 12 и 24 ч.
serpoff@gmail.com Баклаушев В.П.