Внезародышевые ткани, в частности строма пупочного канатика, являются перспективным источником мультипотентных мезенхимных стромальных клеток для регенеративной медицины. В последние годы было предложено несколько методов выделения мезенхимных стромальных клеток из различных компартментов пуповины, основанных на ферментативной дезагрегации ткани или на методе тканевых эксплантатов. В данной работе предложен протокол выделения мультипотентных мезенхимных стромальных клеток из цельной пуповины, сочетающий преимущества каждого из подходов и позволяющий получать клетки в количествах, достаточных для последующего экспериментального или клинического применения. Сочетание кратковременной инкубации тканевых фрагментов в холодном растворе коллагеназы с последующим их культивированием в виде эксплантатов позволило существенно повысить выход клеток с высокой пролиферативной активностью, характерным для мультипотентных мезенхимных стромальных клеток фенотипом и сохранной способностью к дифференцировке.