Фармакология и токсикология
Разработка системы скрининга глиптинов на основе рекомбинантной секретируемой формы дипептидилпептидазы-4
Е. А. Ахраменко1, Е. Д. Мордвинова1,2, М. К. Маренина2, С. О. Куранов2, Н. В. Волкова1, А. С. Исаева1, Е. А. Волосникова1, В. Н. Никитин1, Д. Н. Щербаков1,2, М. В. Хвостов2 - 311-316
1ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора, р.п. Кольцово, Новосибирская область, РФ; 2Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук, Новосибирск, РФ
Разработана система для скрининга ингибиторов дипептидилпептидазы-4 (DPP4) — мишени для терапии сахарного диабета 2-го типа. Получен рекомбинантный секретируемый DPP4 с удалённым трансмембранным доменом на основе суспензионной культуры клеток CHO-K1-S. Выход целевого белка после аффинной очистки составил 0,125 г/л. Продемонстрирована каталитическая активность фермента (Km = 46,75 мкМ) и его чувствительность к эталонному ингибитору ситаглиптину (IC50 = 21,1 нМ). Валидированная система является надёжным инструментом для доклинического поиска новых глиптинов.
Ключевые слова: дипептидилпептидаза-4; рекомбинантный белок; сахарный диабет 2-го типа; сита­глиптин
Адрес для корреспонденции: mordvinova97@mail.ru Мордвинова Е
DOI: 10.47056/0365-9615-2026-181-3-311-316 EDN: MFFEZQ;
Development of a gliptin screening system based on a recombinant secreted form of dipeptidyl peptidase-4
E. A. Akhramenko1, E. D. Mordvinova1,2, M. K. Marenina2, S. O. Kuranov2, N. V. Volkova1, A. S. Isaeva1, E. A. Volosnikova1, V. N. Nikitin1, D. N. Shcherbakov1,2, M. V. Khvostov2
1State Research Center of Virology and Biotechnology "VECTOR", Federal Service for Surveillance on Consumer Rights Protection and Human Wellbeing, Koltsovo, Novosibirsk region, Russia; 2Vorozhtsov Novosibirsk Institute of Organic Chemistry, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, Novosibirsk, Russia
A system was developed for screening inhibitors of dipeptidyl peptidase-4, a therapeutic target for type 2 diabetes mellitus. Recombinant secretory DPP4 variant lacking the transmembrane domain was expressed in a CHO-K1-S cell suspension culture. Affinity purification yielded 0,125 g/liter of the target protein. The catalytic activity of the enzyme (Km = 46,75 µM) and its sensitivity to the reference inhibitor sitagliptin (IC50 = 21,1 nM) were demonstrated. This validated system represents a reliable tool for preclinical screening for new gliptins.
Key Words: dipeptidyl peptidase-4; recombinant protein; diabetes type 2; sitagliptin