Генетика
Экспрессия АХЭ-домена тиреоглобулина в цельной крови пациентов с тиреоидной патологией
А. В. Зубков1, И. В. Зубкова2, О. А. Свитич1,2, В. В. Фадеев2, Л. Г. Бутова1 - 78-85
1Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва, РФ; 2ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет), Москва, РФ
Экспрессия гомологичного ацетилхолинэстеразе (АХЭ) домена тиреоглобулина (ТГ) выявлена в пробах цельной крови пациента с диффузным токсическим зобом и здорового донора. Образцы кДНК гена TG АХЭ-домена синтезированы на мРНК, выделенной из проб цельной крови. С помощью трёх из шести пар праймеров, синтезированных для амплификации фрагментов кДНК гена TG человека на участок ТГ АХЭ-домена, удалось получить и клонировать в вектор pAl2-T четыре ПЦР-продукта. Методами ПЦР и секвенирования по Сэнгеру установлено, что в геноме донора выявлен фрагмент кДНК TG АХЭ- домена 900 п.н. с тремя нуклеотидными заменами: 7408C>T, 7501T>C и 7589G>A; в геноме пациента с диффузным токсическим зобом выявлен фрагмент кДНК TG АХЭ-домена 900 п.н., который содержит одну нуклеотидную замену 8071C>T. Экспрессия этих фрагментов в эукариотических клеточных линиях может послужить основой для получения рекомбинантных пептидов тиреоглобулина в тест-системах, позволяющих проводить комплексную диагностику различных заболеваний щитовидной железы.
Ключевые слова: аутоантигены щитовидной железы; тиреоглобулин; ТГ АХЭ-домен; рекомбинантный вектор; мутации в гене ТГ
Адрес для корреспонденции: alex_zubkov@list.ru Зубков А
DOI: 10.47056/0365-9615-2026-181-1-78-85 EDN: WFHLNH
Expression of the AChE domain of thyroglobulin in whole blood of patients with thyroid pathology
A. V. Zubkov1, I. V. Zubkova2, O. A. Svitich1,2, V. V. Fadeev2, L. G. Butova1
1I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia; 2I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University), Moscow, Russia
The expression of the acetylcholinesterase (AChE)-homologous domain of thyroglobulin (TG) was detected in whole blood samples from a patient with Grave’s disease and a healthy donor. cDNA samples of the TG AChE domain gene were synthesized on mRNA isolated from whole blood samples. Using three of the six pairs of primers synthesized to amplify cDNA fragments of the human TG gene onto a site of the TG AChE domain, four PCR products were obtained and cloned into the pAl2-T vector. Using PCR and Sanger sequencing, a cDNA fragment of the TG gene of the AChE domain 900 bp with three nucleotide substitutions (7408C>T, 7501T>C and 7589G>A) was detected in the donor’s genome. In the genome of a patient with Grave’s disease, cDNA fragment of the TG gene of the AChE domain 900 bp containing one nucleotide substitution 8071C>T was detected. The expression of these fragments in eukaryotic cell lines may serve as the basis for the production of recombinant TG peptides in test systems that allow for the comprehensive diagnosis of various thyroid diseases.
Key Words: thyroid autoantigens; thyroglobulin; TG AChE domain; recombinant vector; mutations in the TG gene