Сопряжённый с G-белком рецептор-1 желчных кислот TGR5 принадлежит к семейству трансмембранных белков, передающих сигналы внутрь клетки. Тау­ро­холевая кислота (ТХК) является природной биологически активной жел­чной кислотой, регулирующей TGR5-опосредованную противовоспалительную иммунную реакцию, которая является перспективной мишенью для медикаментозной терапии некоторых воспалительных заболеваний. Ранее мы установили, что ТХК-зависимая иммунная регуляция может осуществляться посредством модулирования экспрессии генов и белков ФНО-α и ИЛ-1β. В настоящем исследовании мы изучали противовоспалительные иммунорегуляторные эффекты ТХК, осуществляемые через рецепторы TGR5. С помощью ИФА, количественной ПЦР, иммунофлуоресценции и вестерн-блоттинга исследовали противовоспалительные сигнальные пути, опосредованные TGR5, и оценили влияние ТХК на уровень цитокинов ФНО-α и ИЛ-1β. ТХК специфически индуцировала интернализацию TGR5 и дозозависимым образом усиливала синтез цАМФ в культуре клеток HEK-293T, трансфицированных геном TGR5. При этом действие литохолевой кислоты, конъюгированной с таурином, на синтез цАМФ клетками HEK-293T, трансфицированных геном TGR5, было сильнее, чем действие ТХК. ТХК подавляла индуцированное ЛПС повышение экспрессии ФНО-α и ИЛ-1β. Мы разработали и протестировали линию трансфицированных клеток NR8383, экспрессирующих TGR5 человека (клетки NR8383-TGR5). В клетках NR8383 и NR8383-TGR5 белок TGR5 усиливал экспрессию ФНО-α и ИЛ-1β, а ТХК подавляла экспрессию этих цитокинов и соответствующих мРНК. Таким образом, противовоспалительная иммунная реакция, запускаемая ТХК, осуществлялась путём регуляции экспрессии цитокинов ФНО-α и ИЛ-1β через воздействие на TGR5.

TGR5 is a transmembrane protein that transmits the signals into intracellular space. In animals, taurocholic acid (TCA) is a natural bioactive substance in bile acid moiety regulating the TGR5-mediated anti-inflammatory immune response, which is a promising pharmacological target for treating some diseases associated with inflammation. Previously, we established that TCA-mediated immunoregulation could be implemented via modulation of expression of genes and proteins TNFα and IL-1β. In this study, we examined TGR5-mediated anti-inflammatory immune regulation by TCA. The anti-inflammatory signal transduction pathways triggered by TGR5 and the effects of TCA on TNFα and IL-1β were studied using ELISA, real-time quantitative PCR, immunofluorescence, and Western blotting. TCA specifically induced TGR5 internalization and up-regulated production of cyclic AMP in a dose-dependent manner in HEK-293T cells transfected with TGR5 gene. Еhe effect of taurine-conjugated lithocholic acid (TLCA) on production of cyclic AMP was stronger than that of TCA in HEK-293T cells transfected with TGR5 gene. LPS elevated expression of TNFα and IL-1β, but this proinflammatory effect was inhibited by TCA. A novel type of NR8383 cell line expressing human TGR5 (NR8383-TGR5 cells) was developed and tested. In NR8383 and NR8383-TGR5 cells, TGR5 increased expression of TNFα and IL-1β, but TCA inhibited expression of these cytokines and their mRNAs. Thus, the anti-inflammatory immune regulatory action of TCA is mediated via TGR5, which modulates expression of TNFα and IL-1β.