Содержание и архив номеров
2024 г., Том 178, № 9 СЕНТЯБРЬ
Иммунология и микробиология
Иммунохимическая характеристика и функциональная активность моноклональных антител, полученных к рекомбинантной форме пневмолизина
Моноклональные антитела (мкАТ) IgG1-изотипа, полученные к полноразмерной форме рекомбинантного пневмолизина (rPly), не распознавали или слабо распознавали конформационные эпитопы нативного пневмолизина в ИФА. При этом поликлональные антитела — пкАТ(rPly) — выявляли нативный пневмолизин в сэндвич-ИФА при их использовании в качестве захватывающих и детектирующих антител одновременно. Все мкАТ(rPly) ингибировали гемолиз эритроцитов, индуцированный нативным пневмолизином. При сочетанном применении мкАТ(rPly) не выявлено прироста оптической плотности в ИФА и усиления ингибирования гемолитической активности, что свидетельствует о направленности мкАТ(rPly) к одному и тому же или пространственно близко расположенным эпитопам. пкАТ(rPly) обладали существенно большей способностью ингибировать гемолиз эритроцитов по сравнению с мкАТ(rPly).
Ключевые слова: моноклональные антитела; рекомбинантный пневмолизин; нативный пневмолизин; ингибирование гемолитической активности; сэндвич-ИФА
Адрес для корреспонденции: kurbatova6162@yandex.ru Курбатова Е.А.
DOI: 10.47056/0365-9615-2024-178-9-336-341
Immunochemical characteristics and functional activity of monoclonal antibodies obtained to the recombinant form of pneumolysin
Monoclonal antibodies (mAbs) of the IgG1 isotype obtained to the full-size form of recombinant pneumolysin (rPly) did not recognize or poorly recognized conformational epitopes of native pneumolysin in ELISA. At the same time, polyclonal antibodies — pAbs(rPly) — detected native pneumolysin in sandwich ELISA when they were used as capture and detection antibodies simultaneously. All mAbs(rPly) inhibited erythrocyte hemolysis induced by native pneumolysin. The combined use of mAbs(rPly) did not reveal an increase in optical density in ELISA and an increase in inhibition hemolytic activity, which indicates the orientation of mAbs(rPly) to the same or spatially closely located epitopes. pAbs(rPly) had a significantly greater ability to inhibit erythrocyte hemolysis compared to mAbs(rPly).
Key Words: monoclonal antibodies; recombinant pneumolysin; native pneumolysin; inhibition of hemolytic activity; sandwich ELISA