В работе изучено влияние актеозида на модели H₂O₂-вызванного повреждения эпителиальных клеток роговицы человека (ЭКРЧ). ЭКРЧ разделяли на 4 группы: интактные и контрольные клетки культивировали в нормальной среде, а клетки групп ДМСО и "актеозид" — в среде, содержавшей ДМСО или 160 мкМ актеозида соответственно. Через 24 ч ко всем клеткам (кроме интактных) вносили 300 мкМ H₂O₂, после чего ЭКРЧ культивировали в течение 4 ч. Рабочие концентрации актеозида и H₂O₂ определяли по выживаемости клеток с помощью CCK8-теста. Защитное влияние актеозида и повреждающее действие H₂O₂ оценивали по экспрессии индикаторных белков Nrf2-ARE-сигнального пути (ядерный фактор эритроидного происхождения 2 (Nrf2), гемоксигеназа-1 (HO-1), NADPH:хиноноксидоредуктаза-1 (NQO-1) и циклооксигеназа-2 (COX-2)), которую определяли с помощью вестерн-блоттинга. Экспрессию соответствующих мРНК определяли с помощью количественной ПЦР. Пролиферацию ЭКРЧ исследовали, окрашивая клетки 5-этинил-2’-дезоксиуридином (EdU). Показано, что актеозид защищал ЭКРЧ против H₂O₂-вызванного повреждения путём ингибирования экспрессии Nrf2, HO-1, NQO-1 и COX-2.

The study examined the effect of Acteoside on a model of human corneal epithelial cells (HCECs) injury induced by H₂O₂. HCECs were divided into 4 groups cultured for 24 h in normal medium (intact control and model group), with medium containing DMSO (experimental control), or with medium containing Acteoside (Acteoside group). Then, H₂O₂ solution was added to HCES cells for 4 h, expect for intact control cells. The CCK8 method was employed to assess cell survivability in order determine the working concentrations of Acteoside and H₂O₂ to be used in further experiments. The quantitative PCR and Western blotting were used to determine the effect of Acteoside and H₂O₂ on expression of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), heme oxygenase-1 (HO-1), NADPH:quinone oxidoreductase-1 (NQO-1), and cyclooxygenase-2 (COX-2). The effects of these agents on cell proliferation were assessed with EdU staining method. It was established that Acteoside protected HCEC against H₂O₂-induced damage by inhibition of expression of Nrf2, HO-1, NQO-1, and COX-2.