Вирусология
Получение и конструирование химерного гуманизированного широкореактивного антитела 10Н10 к белку Е вируса клещевого энцефалита
Получено полноразмерное гуманизированное химерное антитело 10Н10ch, специфично взаимодействующее с поверхностным гликопротеином Е флавивирусов. Для его конструирования использовали вариабельные фрагменты тяжёлой и лёгкой цепи моноклонального антитела 10Н10, формирующие активный центр антитела, и фрагмент константной части тяжёлой цепи антитела IgG1 человека. Полученное полноразмерное химерное гуманизированное антитело 10Н10ch специфически взаимодействовало c белком Е таких патогенных для человека флавивирусов, как вирусы клещевого энцефалита, Зика, Западного Нила и денге. Иммунохимическая оценка констант взаимодействия антител 10Н10ch c панелью нативных и рекомбинантных антигенов флавивирусов с помощью ИФА и биослой­ной интерферометрии показала, что константа диссоциации (Kd) химерного антитела находится в наномолярной области и сравнима с таковой у высокоаффинного мышиного моноклонального антитела 10Н10. Обсуждается возможность использования полученного химерного гуманизированного антитела 10Н10ch для диагностики, профилактики и лечения различных флавивирусных инфекций.
dan6091154224@gmail.com Шаньшин Д.В.
10.47056/0365-9615-2024-177-6-757-761
Preparation and construction of chimeric humanized broadly reactive antibody 10H10 to protein e of tick-borne encephalitis virus
A full-length humanized chimeric antibody 10H10ch was obtained, which specifically interacts with the surface glycoprotein E of flaviviruses. To construct it, we used variable fragments of the heavy and light chain of the monoclonal antibody 10H10, which form the active center of the antibody, and a fragment of the constant part of the heavy chain of the human IgG1 antibody. The resulting full-length chimeric humanized antibody 10H10ch specifically interacted with the E protein of flaviviruses pathogenic to humans, such as tick-borne encephalitis, Zika, West Nile, and dengue viruses. An immunochemical assessment of the interaction constants of the 10H10ch antibody with a panel of native and recombinant flavivirus antigens using ELISA and biolayer interferometry showed that the dissociation constant (Kd) of the chimeric antibody is in the nanomolar region and is comparable to that of the high-affinity mouse monoclonal antibody 10H10. The possibility of using the resulting chimeric humanized antibody 10H10ch for the diagnosis, prevention and treatment of various flavivirus infections is discussed.