Биофизика и биохимия
Идентификация гигантских изоформ обскурина в поперечнополосатых мышцах крысы с использованием поликлональных антител
С помощью полученных поликлональных антител, специфичных к N-последовательности (61-298 а.о.) обскурина крысы, исследован изоформный состав этого белка в четырёх поперечнополосатых мышцах: миокарде левого желудочка сердца, диафрагме, икроножной (m. gastrocnemius, содержит преимущественно "быстрые" волокна) и камбаловидной (m. soleus, содержит преимущественно "медленные" волокна). В m. gastrocnemius, m. soleus и диафрагме обнаружены две гигантские изоформы обскурина: более низкомолекулярная А-изоформа и более высокомолекулярная В-изоформа. Их молекулярные массы составили ~870 и ~1150 кДа в диафрагме и m. gastrocnemius, ~880 и ~1130 кДа в m. soleus соответственно. Соотношение количественного содержания В-изоформы к А-изоформе обскурина — 1:3 в диафрагме и m. soleus, 1:4 в m. gastrocnemius. В миокарде левого желудочка сердца крысы обнаружена А-изоформа обскурина ~880 кДа. В диапазоне молекулярных масс от 10 до ~800 кДа других изоформ обскурина или их фрагментов в исследованных поперечнополосатых мышцах крысы не выявлено. Полученные антитела рекомендуются для исследований качественных и количественных изменений гигантских изоформ обскурина в поперечнополосатых мышцах крысы в норме и при развитии патологических процессов.
ivanvikhlyantsev@gmail.com Вихлянцев И.М.
10.47056/0365-9615-2024-177-6-711-716
Identification of giant isoforms of obscurin in striated rat muscles using polyclonal antibodies
Using produced polyclonal antibodies specific to the N-sequence (residues 61-298) of rat obscurin, we investigated the isoform composition of this protein in four striated muscles: heart left ventricle, diaphragm respiratory muscle, skeletal m. gastrocnemius (containing mainly fast fibers), and skeletal m. soleus (containing mainly slow fibers). The m. gastrocnemius, m. soleus, and diaphragm were found to have two giant isoforms of obscurin: a lower-molecular-weight A-isoform and a higher-molecular-weight B-isoform. Their molecular weights were ~870 kDa and ~1150 kDa in the diaphragm and m. gastrocnemius, ~880 and ~1130 kDa in m. soleus, respectively. The ratio of the B-isoform to the A-isoform was 1:3 in the diaphragm and m. soleus; 1:4, in the m. gastrocnemius. In the cardiac left ventricle, the A-isoform of obscurin with a molecular weight of ~880 kDa was found. No other obscurin isoforms or their fragments were revealed in the investigated striated rat muscles within the molecular weight range of 10 up to ~800 kDa. The antibodies produced are recommended for research into qualitative and quantitative changes of giant obscurin isoforms in striated rat muscles in the norm and during the development of pathological processes.