Общая патология и патологическая физиология
Спонтанная и стимулированная продукция цитокинов клетками крови ex vivo как биомаркер исходно высокой или низкой устойчивости к гипоксии у крыс
Оценивали спонтанную и стимулированную продукцию цитокинов клетками периферической крови, полученной из хвостовой вены самцов крыс Вистар до определения их устойчивости к недостатку кислорода в барокамере. Для исследования спонтанной продукции цитокинов клетки гепаринизированной крови инкубировали в культуральной среде (24 ч, 5% СО2, 37ºС) и в культураль­ной жидкости методом ИФА оценивали содержание провоспалительных цитоки­нов IL-6 и TNFα, а также противовоспалительного IL-10. Для стимуляции продукции цитокинов клетки крови инкубировали 24 ч с ЛПС, ФГА и КонА в конечных концентрациях 2, 4 и 4 мкг соответственно. Через 2 нед после забора крови определяли индивидуальную устойчивость животных к гипоксии в барокамере. У низкоустойчивых к гипоксии животных были статистически значимо выше уровни спонтанной продукции всех трёх исследованных цитокинов, а при стиму­ляции клеток крови у этих крыс более чем в 2 раза повышался уровень IL-1β. При значениях спонтанной продукции IL-10>50 пг/мл, IL-6>10 пг/мл, TNFα>10 пг/мл, а также при повышении продукции IL-1β более чем в 2 раза при стиму­ляции животных относили к низкоустойчивым особям, при IL-10<15 пг/мл, IL-6<9 пг/мл, TNFα<7 пг/мл, а также отсутствии повышения продукции IL-1β при стимуляции — к высокоустойчивым. Выявленные особенности спонтанной и стимулированной продукции цитокинов могут быть использованы в качестве неинвазивных биомаркеров для определения устойчивости к гипоксии без воздействия сублетальной гипоксической нагрузки в барокамере.
juliajal93@mail.ru Джалилова Д.Ш.
10.47056/0365-9615-2024-177-4-419-423
Spontaneous and stimulated production of cytokines by blood cells ex vivo as a biomarker of initially high or low hypoxia resistance in rats
Spontaneous and stimulated production of cytokines by peripheral blood cells obtained from the tail vein of male Wistar rats was assessed before their resistance to oxygen deficiency in a decompression chamber evaluation. To study the spontaneous production of cytokines, heparinized blood cells were incubated in a culture medium (24 hours, 5% CO2, 37°C) and the content of pro-inflammatory cytokines IL-6 and TNFα, as well as anti-inflammatory IL-10, was assessed in the culture liquid using ELISA. To stimulate cytokine production, blood cells were incubated for 24 h with LPS, PHA, and ConA at final concentrations of 2, 4, and 4 μg, respectively. Two weeks after blood sampling, the animals' individual resistance to hypoxia in a decompression chamber was determined. In animals with low resistance to hypoxia, levels of spontaneous production of all three cytokines studied were statistically significantly higher, and upon stimulation of blood cells in these rats, the level of IL-1β increased more than 2-fold. At values of spontaneous production of IL-10>50 pg/ml, IL-6>10 pg/ml, TNFα>10 pg/ml, as well as with the increase in IL-1β production by more than 2 times upon stimulation, animals were classified as low-resistant. At IL-10<15 pg/ml, IL-6<9 pg/ml, TNFα<7 pg/ml, as well as the absence of an increase in IL-1β production upon stimulation, they are classified as high-resistant. The identified features of spontaneous and stimulated production of cytokines can be used as non-invasive biomarkers to determine resistance to hypoxia without exposure to sublethal hypoxia in a decompression chamber.