Цисплатин, препарат первой линии для лечения немелкоклеточного рака лёгких (НМРЛ), часто утрачивает эффективность из-за приобретённой лекарственной устойчивости. Главной причиной резистентности к цисплатину и прогрессирования рака считают присутствие опухолевых стволовых клеток, в появлении и развитии которых участвует тирозинкиназа Src. В работе изучено влияние Src на онкогенные свойства резистентных к цисплатину клеток НМРЛ линий H358R и A549R и определена эффективность ингибирования этой тирозинкиназы для восстановления чувствительности клеток к цисплатину методами вестерн-блоттинга и иммунофлюоресцентного окрашивания. Также исследовали миграцию, инвазию и способность к формированию сфероидов и клонов у H358R и A549R клеток. Показано, что у H358R и A549R клеток уровни фосфорилированной киназы Src (pSrc) и маркера стволовости CD133 были выше, чем у клеток родительских линий. Кроме того, резистентные клетки отличались повышенной способностью к самообновлению и образовывали бóльшие сфероиды по сравнению с H358 и A549 клетками. Подавление Src с помощью её ингибитора CGP77675 снизило стволовость клеток H358R и A549R, а также усилило ингибирование цисплатином их пролиферации, миграции и инвазии. Таким образом, Src-индуцированная стволовость играет важную роль в развитии резистентности клеток НМРЛ к цисплатину. Ингибирование Src снижает стволовость раковых клеток НМРЛ и усиливает их чувствительность к цисплатину, что может быть полезным для лечения резистентных к этому препарату форм НМРЛ.

The first-line chemical drug cisplatin used to treat the non-small cell lung cancer (NSCLC) often loses effectiveness due to acquired drug resistance. The main reason of this effect and related cancer progression is the presence of cancer stem cells (CSC) in the tumor. Tyrosine kinase Src is responsible for appearance and development of CSC. In this study, we examined the effects of Src on oncogenic properties of cisplatin-resistant NSCLC cell lines (H358R and A549R) and the effect of inhibition of this tyrosine kinase on sensitivity of the cancer cells to cisplatin by Western blotting and immunofluorescence staining as well as migration, invasion, sphere colony and clone formation assays. In H358R and A549R cells, the levels of phosphorylated kinase Src (pSrc) and the stemness marker CD133 were elevated in comparison with the parental ones. The cisplatin-resistant cells demonstrated increased self-renewal ability, and they formed significantly bigger tumor spheres than their parental cells. Inhibition of Src by pyrrolopyrimidine CGP77675 attenuated the stemness of H358R and A549R cells; moreover, it enhanced the inhibitory effects of cisplatin on cell proliferation, migration, and invasion. The data indicated that Src-induced stemness plays an important role in developed resistance of NSCLC cells to cisplatin. Inhibition of Src attenuated stemness and acquired resistance to cisplatin, which may be beneficial for treating the cisplatin-resistant NSCLC.