Экспериментальные методы — клинике
Метод получения слёзной жидкости для изучения её антиоксидантных свойств
Разработана методика получения слёзной жидкости с использованием полосок Ширмера для определения в ней активности основных ферментов антиоксидантной защиты (СОД, каталазы и глутатионпероксидазы). Степень извлечения исследованных ферментов из проб составляет более 85%. Методом цитометрии установлено, что при отборе слёзной жидкости возможен перенос клеток конъюнктивы и роговицы на поверхность полосок Ширмера, что приводит к попаданию внутриклеточной фракции ферментов антиоксидантной защиты в получаемые образцы. Предложен подход, позволяющий при отборе слёзной жидкости избежать контаминации в неё СОД, каталазы и глутатионпероксидазы из клеток роговицы и конъюнктивы. Разработанная методика позволяет увеличить точность определения активности ферментов антиоксидантной защиты в слёзной жидкости и может быть использована для диагностики патологий глазной поверхности в клинической практике.
senin@belozersky.msu.ru Сенин И.И.
10.47056/0365-9615-2023-175-4-494-499
Method for obtaining and determining the antioxidant enzyme activity in the tear fluid
A new method is described in this report which retains the simplicity of the Schirmer strip technique for collection and determining the activity of the main antioxidant defense enzymes (superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase) in the tear fluid. We found that conjunctival and corneal cells transferred to the surface of Schirmer strips during the tear collection and increase a risk of contamination of the tear samples with cytosolic antioxidant defense enzymes. An approach is proposed to avoid contamination of intracellular superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase from corneal and conjunctival cells during tear fluid sampling. The developed technique makes it possible to increase the accuracy of determining the activity of antioxidant protection enzymes in tear fluid and can be used for diagnostics of ocular surface pathologies in clinical practice.