Кольцевые РНК (circRNA) принимают участие в патогенезе ишемического инсульта. В настоящей работе исследовали механизм действия circ_0005585 при ишемическом инсульте, который моделировали у мышей путём окклюзии средней мозговой артерии (ОСМА). Экспрессию circ_0005585 и miR-16-5p оценивали с помощью количественной ПЦР в реальном времени с обратной транскрипцией. Объём ишемического очага оценивали путём окрашивания хлоридом трифенилтетразолия. Неврологический статус оценивали по Neurological Severity Score. Проницаемость ГЭБ оценивали окрашиванием синим Эванса и измерением содержания воды в мозге. Апоптоз в тканях головного мозга оценивали с помощью TUNEL-теста. Экспрессию белков, связанных с апоптозом, определяли вестерн-блоттингом. Прямую связь circ_0005585 и miR-16-5p проверяли с помощью двойного люциферазного репортёрного анализа. Выявлено, что у мышей с ОСМА в тканях мозга достоверно снижалась экспрессия circ_0005585. В экспериментах с лентивирусной трансфекцией показано, что сверхэкспрессия circ_0005585 снизила неврологический дефицит и уменьшила объём ишемического очага. При этом содержание воды в мозге и проницаемость ГЭБ снизились. Кроме того, повышенная экспрессия circ_0005585 ингибировала апоптоз в тканях мозга. Следовательно, circ_0005585 непосредственно взаимодействует с miR-16-5p. Таким образом, circ_0005585 защищает мозг мышей при ишемическом инсульте путём взаимодействия с miR-16-5p, что уточняет особенности патогенеза этого заболевания и указывает на новые пути его лечения.

Circular RNAs are implicated in pathogenesis of ischemic stroke. In this work, we explored the modulation and potential mechanisms of circ_0005585 in ischemic stroke. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) was performed to develop model of ischemic stroke in mice. Expressions of circ_0005585 and miR-16-5p were assessed by quantitative real-time reverse transcription PCR. The infarct volume was assessed by triphenyl tetrazolium chloride staining. Neurological deficits were evaluated according to Neurological Severity Score. Blood—brain barrier permeability was assessed by Evan's blue leakage and brain water content. Apoptosis in brain tissues was measured with TUNEL test. Relative expression of apoptosis-related protein was evaluated by Western blotting. The direct interaction between circ_0005585 and miR-16-5p was verified by dual-luciferase reporter assay. The expression of circ_0005585 expression was lower in mice with MCAO. Lentivirus-mediated overexpression of circ_0005585 ameliorated the neurological deficits and decreased the infarction volume in MCAO mice. The brain water content and Evan's blue leakage through blood—brain barrier were reduced. In addition, overexpression of circ_0005585 inhibited apoptosis in cerebral tissues. Our results revealed direct interaction between circ_0005585 and miR-16-5p. Thus, circ_0005585 protects mouse brain during ischemic stroke by targeting miR-16-5p, which uncovers the pathogenesis of this pathology and opens the novel vitas for its therapy.