Иммунология и микробиология
Продукция антигена-1 стволовых клеток Sca-1/Ly-6A/E свежеизолированными NK-клетками, культивируемыми с релевантными цитокинами
В определённых условиях активированные NK-клетки экспрессируют антиген-1 стволовых клеток (Sca-1/Ly-6A/E). Для изучения факторов, влияющих на этот процесс, мы изолировали NK-клетки из селезёнки мышей и культивировали их в присутствие разных комбинаций релевантных цитокинов (IL-12, IL-15, IL-18 и IFNγ). Добавление IL-12 к комбинации IL-15 и IL-18 достоверно повышало продукцию антигена Sca-1 культивируемыми NK-клетками по сравнению с применением только комбинации IL-15 и IL-18. Для проверки гипотезы о связи наблюдаемого действия IL-12 со стимуляцией продукции клетками IFNγ в отдельных опытах вместо IL-12 апплицировали IFNγ, а в других опытах IL-12 применяли совместно с анти-IFNγ-антителами. В случае применения IFNγ вместо IL-12 увеличение продукции Sca-1 не наблюдали. Напротив, апплицирование IL-12 совместно с анти-IFNγ-антителами увеличивало продукцию Sca-1 подобно результатам, полученным в опытах со стимуляцией клеток цитокинами IL-15/IL-18+IL-12 без анти-IFNγ-антител. Таким образом, IL-12 активирует продукцию Sca-1 NK-клетками через IFNγ-независимый сигнальный путь.
iskrasainova@gmail.com Markova Tz.
10.47056/0365-9615-2022-174-7-74-78
Sca-1/Ly-6A/E production by freshly isolated NK cells cultured with relevant cytokines
Activated NK cells in appropriate conditions are known to express stem cell antigen 1 (Sca-1/Ly-6A/E). To investigate its production, NK cells isolated from mouse spleens were incubated ex vivo in the presence of different combinations of cytokines (IL-12, IL-15, IL-18, and IFNγ). Expression of Sca-1 was found to be considerably higher in NK cells incubated in the presence of IL-18 and IL-15 with added IL-12 than in those treated with IL-15 and IL-18 only. To test the hypothesis that the effect of IL-12 was due to stimulation of IFNγ production, we replaced IL-12 with IFNγ in some samples, and added specific anti-IFNγ antibody to a proportion of samples cultivated with IL-15/IL-18+IL-12. In the subpopulations incubated in the presence of IL-15/IL-18 with added IFNγ instead of IL-12, the expression of Sca-1 was not increased. By contrast, in samples treated with IL-15/IL-18+IL-12 and anti-IFNγ antibody, the expression of Sca-1 was activated to a similar extent as in those stimulated by IL-15/IL-18+IL-12 combination without the antibody. The obtained data suggest that IL-12 activates the production of Sca-1 by NK cells through an IFNγ-independent mechanism.