Генетика
Культивирование кардиальных клеток в составе 3D-сфероидов модулирует их экспрессионный профиль и повышает секрецию проангиогенных факторов роста
В работе изучали влияние 3D-культивирования клеток в виде кардиосфер на экспрессию генов сосудистых клеток-предшественниц и регуляторов ангиогенеза, а также продукцию проангиогенных факторов. Кардиосферы получали методом культуры мышиных кардиальных эксплантов с последующей самосборкой на поли-Д-лизине. Экспрессию генов оценивали методом ПЦР в реальном времени, а продукцию проангиогенных факторов — с помощью Microarray-анализа секретома клеток. Выявлено, что клетки в составе кардиосфер по сравнению с 2D-культурой кардиосферообразующих клеток обладали повышенной экспрессией маркеров сосудистых прогениторных клеток (Pdgfrα, Kit, Vegfr1) и факторов-регуляторов ангиогенеза (Vegf, Fgf2, Angpt1), а также повышенной секрецией проангиогенных факторов (ANGPT1, VEGF, CXCL16, PIGF-2). Таким образом, культивирование клеток в составе кардиосфер может рассматриваться в качестве основы для разработки подходов повышения их ангиогенной активности и регенеративных свойств.
doctorkote@gmail.com Дергилев К.В.
10.47056/0365-9615-2022-173-2-212-216
Cultivation of cardiac cells in a 3D spheroid state modulates their expression profile and increases secretion of pro-angiogenic growth factors
We studied the effect of 3D cell culture in a cardiosphere state on the gene expression of vascular progenitor cell markers and angiogenesis regulators, as well as the production of proangiogenic factors. Cardiospheres were obtained by culture of mice cardiac explants followed by self-assembly on poly-D-lysine. Gene expression was assessed by real-time PCR, and the production of proangiogenic factors was assessed by Microarray analysis of the cell secretome. It was found that cells in the cardiospheres compared with 2D-culture of cardiosphere-forming cells had increased expression of vascular progenitor cell markers (Pdgfrα, Kit, Vegfr1) and angiogenesis regulatory factors (Vegf, Fgf2, Angpt1), as well as an enhanced secretion of pro-angiogenic factors (ANGPT1, VEGF, CXCL16, PIGF-2). Thus, the cultivation of cells in the cardiosphere state can be considered as a basis for developing approaches to increase their angiogenic activity and regenerative properties.