Изучали влияние двухвекторной системы доставки гена DYSF на основе капсидов аденоассоциированного вируса 9 серотипа на патоморфологические проявления дисферлинопатии в скелетных мышцах мышей линии Bla/J (с отсутствием экспрессии DYSF). Внутривенно вводили 3×10¹³ геномных копий вируса, включающего двухвекторную систему. Через 3, 6 и 12 нед от момента введения для патогистологического исследования забирали m. gastrocnemius, m. psoas major, m. vastus lateralis и m. gluteus superficialis. Положительным контролем служили здоровые мыши дикого типа (линия С57BL/6), выведенные из эксперимента через 3 нед после введения 150 мкл 0.9% NaCl в хвостовую вену. Для определения дисферлина на криосрезах мышц проводили иммунофлюоресцентные реакции с диагностическими антителами; парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином для оценки морфометрических показателей. После введения генотерапевтического препарата во всех исследованных мышцах детектировались мышечные волокна с мембранным или цитоплазматическим расположением дисфер­лина; было выявлено снижение доли некротизированных мышечных волокон, увеличение количества центральноядерных мышечных волокон и уменьшение средней площади поперечного сечения мышечного волокна.

Effects of a dual-vector DYSF gene delivery system based on adeno-associated virus serotype 9 capsids on pathological manifestations of dysferlinopathy in skeletal muscles of Bla/J mice (without DYSF expression) were studied. An AAV-based dual-vector system was intravenously injected with 3×10¹³ genomic copies. M. gastrocnemius, m. psoas major, m. vastus lateralis, and m. gluteus superficialis were obtained for a histological examination in 3, 6, and 13 weeks after the administration. Healthy wild-type (C57BL/6) mice sacrificed 3 weeks after injection of 150 µl of 0.9% NaCl into the tail vein were used as positive controls. To detect dysferlin in muscle cryosections, immunohistochemistry was performed, paraffin sections were stained with hematoxylin and eosin for the assessment of morphometric parameters. After the administration of gene-therapeutic constructs muscle fibers with a membrane or cytoplasmic dysferlin location were detected in all the muscles examined; a proportion of necrotic muscle fibers decreased, the number of central nuclear muscle fibers increased and an average area of muscle fiber cross-section reduced.