Изучено влияние гена CCDC3 на жизнеспособность культуры клеток РМЖ человека линии MDA-MB-231. С помощью количественной ПЦР в реальном времени с обратной транскрипцией и вестерн-блоттинга определяли уровни относительной экспрессии мРНК CCDC3 и его белка в линиях клеток MDA-MB-231, MCF-7, T-47D и HCC1937. Поскольку клетки линии MDA-MB-231 отличались наиболее высоким уровнем экспрессии мРНК CCDC3 и белка, эту линию трансфекцировали короткими шпилечными РНК (shRNA) с помощью лентивируса. Влияние нокаута CCDC3 на жизнеспособность клеток MDA-MB-231 оценивали с помощью набора Cell Counting Kit-8 (определяли число образующихся колоний клеток), на апоптоз клеток и их цикл — с помощью проточной цитометрии. Нокаут гена CCDC3 достоверно снижал экспрессию этого белка в клетках MDA-MB-231 по сравнению с контролем (p<0.05). Кроме того, CCDC3-нокаут достоверно (p<0.05) ингибировал жизнеспособность клеток и число образующихся колоний, а также усиливало их апоптоз. Таким образом, нокаут CCDC3 снижал жизнеспособность клеток MDA-MB-231 и усиливал их апоптоз. Полученные результаты позволяют считать ген CCDC3 новой мишенью для лечения РМЖ.

This study discusses the effect of CCDC3 on the cell viability of human breast cancer cell line MDA-MB-231. The CCDC3 mRNA and protein levels in cell lines MDA-MB-231, MCF-7, T-47D, and HCC1937 were detected by reverse transcription quantitative real-time PCR and Western blotting. Since MDA-MB-231 cells had higher expression of mRNA CCDC3 and CCDC3 protein, we used this cell line for transfection with short hairpin RNA (shRNAs) by lentivirus. Cell Counting Kit-8 and clone formation assay were used to detect the effects of CCDC3 knockdown on cell viability; flow cytometry was used to detect the effects of CCDC3 knockdown on cell apoptosis and cell cycle. In MDA-MB-231 cell line after CCDC3 knockdown, the CCDC3 protein level was significantly down-regulated in comparison with the control group (p<0.05). The cell viability and the number of clones in the CCDC3-knockdown group were significantly reduced (p<0.05), while the apoptosis rate significantly increased (p<0.05). Thus, after CCDC3-knockdown, cell viability is weakened in MDA-MB-231 cells, and cell apoptosis rate is increased. Therefore, CCDC3 gene is promising as a new candidate target for BC treatment.