Методики
Сравнение флюориметрического и хроматографического методов in vitro измерения активности триптофангидроксилазы 2 — ключевого фермента синтеза серотонина в нервной системе
В работе представлен быстрый метод определения активности фермента триптофангидроксилазы 2 по флюоресценции комплекса 5-гидрокситриптофана (5-HTP) с о-фталевым альдегидом. Проведено сравнение этого метода со стандартным, основанным на хроматографическом выделении 5-HTP с последующим определением его количества с помощью электрохимического детектора. Показана высокая чувствительность флюориметрического метода и сходство результатов, полученных обоими методами. Использование быстрого, недорогого и высокопродуктивного флюориметрического метода позволяет значительно упростить и ускорить определение активности триптофангидроксилазы 2, а также сделать эту процедуру доступной для большинства нейрохимических и фармакологических лабораторий.
v_kulikov@bionet.nsc.ru Куликов А.В.
10.47056/0365-9615-2022-174-10-523-528
Comparison of fluorimetric and chromatographic methods of in vitro assay of tryptophan hydroxylase 2 — the key enzyme of serotonin synthesis in the brain
The rapid and sensitive method of assay of tryptophan hydroxylase 2 enzyme activity based on fluorescence of 5-hydroxytryptophan (5-HTP) is represented in this study. This method was compared with a standard method based on chromatographic separation of 5-HTP and assay of its amount by an electrochemical detector. High sensitivity of the newly developed fluorimetric method and similarity of the results obtained by fluorimetric and chromatographic methods. Application of this rapid and effective fluorimetric method can simplify and facilitate TPH2 activity assay and makes this assay procedure available for wide range of neurochemical and pharmacological laboratories.