Онкология
МикроРНК-139 влияет на радиочувствительность рака пищевода путём воздействия на PDK1/AKT/циклин D1-сигнальный путь
В работе изучали механизм влияния микроРНК-139 (miR-139) на радиорезистентность рака пищевода (РП). Для этого из родительской линии клеток KYSE150 выводили радиорезистентную линию KYSE150R путём обработки дробным облучением в дозе 15×2 Гр (суммарная доза 30 Гр). Клеточный цикл оценивали с помощью проточной цитометрии. Для поиска генов, связанных с радиорезистентностью РП, проводили профилирование экспрессии генов. Проточная цитометрия показала, что в линии KYSE150R увеличивается доля клеток в G1-фазе, но снижается в G2-фазе. При этом экспрессия miR-139 в линии клеток KYSE150R была повышена. Нокаутирование miR-139 снижало радиорезистентность и меняло распределение по фазам клеточного цикла у клеток KYSE150R. По данным вестерн-блоттинганокаутирование miR-139 повышало уровни экспрессии циклина D1, p-AKT и PDK1. Применение ингибитора PDK1 (GSK2334470) отменяло этот эффект в отношении p-AKT и циклина D1. Люциферазный репортёрный анализ показал, что miR-139 непосредственно связывается с 3’-UTR мРНК PDK1. Изучение и анализ клинических данных 110 пациентов с РП выявили связь между экспрессией miR-139 как со стадией РП (по шкале TNM), так и с эффективностью терапии. Экспрессия miR-139 достоверно и положительно коррелировала с общей выживаемостью и с выживаемостью без прогрессирования опухоли. Таким образом, miR-139 повышает радиочувствительность РП путём регулирования клеточного цикла по PDK1/Akt/циклин D1-сигнальному пути.
jiaowenpeng163@163.com Jiao W.P.
10.47056/0365-9615-2022-174-10-501-508
MiR-139 affects radioresistance in oesophageal cancer by targeting the PDK1/AKT/Cyclin D1 signaling pathway
In this study, we explore the mechanism of miR-139 in the radioresistance of oesophageal cancer (OC). The radioresistant cell line KYSE150R was obtained from the parental KYSE150 cell line by fractionated irradiation in a dose of 15×2 Gy (total dose of 30 Gy). The cell cycle of cell lines was detected using flow cytometry. We conducted a gene profiling study to detect the expression of genes related to the radioresistance of OS. In the KYSE150R line, flow cytometry revealed the increased number of cells in G1 phase and decreased number of cells in G2 phase decreased, while the expression of miR-139 increased. Knockdown of miR-139 decreased radioresistance and changed the distribution of cell cycle phases in radioresistant KYSE150R cells. Western blotting indicated that miR-139 knockdown increased the expression levels of cyclin D1, p-AKT, and PDK1. However, PDK1 inhibitor GSK2334470 reversed this effect for P-AKT and cyclin D1 expression. A luciferase reporter assay indicated that miR-139 directly bound to the PDK1 mRNA 3'-UTR. The clinical data obtained and analyzed from 110 patients with OS showed an association between miR-139 expression with the TNM stage and the effect of therapy. MiR-139 expression was significantly correlated with OS and progression-free survival. In conclusion, MiR-139 enhances the radiosensitivity of OS by regulating the cell cycle through the PDK1/Akt/CyclinD1 signaling pathway.