Для получения изолированных кардиомиоцитов новорождённых крысят (КМНК) желудочки сердец новорождённых животных обрабатывали разными ферментами: пищеварительным трипсином (0.06%, метод I); коллагеназой II (0.08%, метод II); а также трипсином (0.06%) и коллагеназой II (0.08%) для поэтапной диссоциации (методы III и IV). После ферментативной диссоциации ткани в раствор добавляли полную среду для остановки этого процесса. Затем клеточные суспензии, полученные методами I-III, центрифугировали. В методе IV клеточную суспензию не центрифугировали, но применяли разные методы адгезии для удаления клеток, которые не являлись КМНК. Методы выделения клеток оценивали по качеству процедуры выделения, чистоте полученной фракции, выживаемости и жизнеспособности клеток, их морфологии, а также по частоте спонтанных сокращений. Выявлено, что метод IV является наиболее простым, эффективным и удобным способом выделения КМНК.

The neonatal rat cardiomyocytes (NRCM) is a popular model to examine the functional activity of the heart. Spontaneous beating of these cells is viewed as a close analog to mechanical activity of cardiomyocytes in vivo. Isolation of NRCM is an important stage in cardiologic studies in vitro. Here, the ventricular muscles of neonatal rats were treated with different digestive solutions: 0.06% trypsin (method I); 0.08% collagenase II (method II; 0.06% trypsin and 0.08% collagenase II for stepwise digestion (methods III and IV). After enzymatic dissociation of the tissue, the complete medium was added to stop this process. The cells suspensions obtained from I-III methods were collected and centrifuged. In contrast, the novel and improved method IV did not use centrifugation. Instead, various methods of adhesion were employed to separate the non-myocardial cells. Different isolation methods were assessed according to quantity, survival rate, morphology, spontaneous pulsation rate, purity, and vitality of the NRCM. These assessments showed that isolation method IV is a simple, efficient, and convenient way to obtain NRCM for culturing.