Содержание и архив номеров
2021 г., Том 171, № 5 МАЙ
Методики
Новый метод изоляции первичной культуры канальцевых эпителиоцитов почек мыши
Для фундаментального изучения этиологии почечных болезней мы разработали улучшенные методы выделения первичных культур эпителиоцитов гломерул и почечных канальцев почек мышей. Начальным этапом выделения этих клеток была перфузия почек in vivo раствором ФСБ с коллагеназой. Для этого накладывали лигатуры на верхнюю брыжеечную и подвздошную артерии, а также на грудной отдел аорты, после чего почки перфузировали через абдоминальный отдел аорты. Затем клетки выделяли из почек ex vivo, оценивали их количество, целостность и жизнеспособность. Разработанный простой и экономически эффективный метод отличается высоким выходом очищенной фракции неповреждённых канальцевых эпителиоцитов необходимых для исследования почек молекулярно-биологическими методами.
Ключевые слова: почки; канальцевые эпителиоциты; коллагеназа; перфузия; первичная культура
Адрес для корреспонденции: zqxing@yeah.net Q. Zhu
DOI: 10.47056/0365-9615-2021-171-5-656-660
Innovation of mouse renal primary tubular epithelial cells isolation
Kidney diseases are becoming an emerging public health problem. In order to further explore the etiology of various kidney diseases, we improved the methods of mouse glomeruli and primary renal tubular epithelial cells isolation. Collagenase perfusion were used for mouse primary renal tubular epithelial cells isolation. Cell integrity, purity, viability and concentration were explored. In this study, we have improved the methods for isolating primary renal tubular epithelial cells. By ligating the superior mesenteric artery, celiac artery and thoracic aorta, then perfuse from the abdominal aorta. The high purity and high concentration integral primary renal tubular epithelial cells were obtained. This protocol provides a cost-effective and simple method to isolate high pure and concentration renal tubular epithelial cells which was useful for molecular biology studies exploring.
Key Words: kidney; renal primary tubular epithelial cells; collagenase; perfusion; primary culture