Изучено влияние и механизмы действия конофиллина в разных концентрациях на in vitro модели миокардиального фиброза (обработка ангиотензином II фибробластов, выделенных из сердец новорождённых крысят). Жизнеспособность клеток, количество коллагена и экспрессию белков оценивали в культурах контрольных и обработанных фибробластов миокарда с помощью МТТ-теста, набора Sircol и вестерн-блоттинга. Конофиллин защищал культивируемые фибробласты от развития фиброза, на что указывали сниженная выживаемость обработанных фибробластов, уменьшенное количество коллагена и пониженная экспрессия α-актина гладких мышц (α-SMA). Конофиллин не влиял на сигнальный путь трансформирующего фактора роста β, изменённого ангиотензином II, но существенно снижал уровень костного морфогенетического белка 4 (BMP4), экспрессия которого индуцировалась как ангиотензином II, так и самим BMP4. Конофиллин не влиял на уровень фосфорилирования α-SMA и гомологов SMAD-1/5/8 (классические сигнальные молекулы на нисходящем от BMP4 пути), однако снижал уровень c-Jun N-терминальной киназы (JNK), который был повышен в результате действия BMP4. Конофиллин не ингибировал развитие миокардиального фиброза в присутствии активатора JNK анисомицина. Таким образом, конофиллин подавлял развитие миокардиального фиброза посредством влияния на BMP4/JNK-сигнальный путь.

Myocardial fibrosis (MF) is a key pathological feature of chronic cardiovascular diseases, which can lead to heart failure, malignant arrhythmia, and sudden cardiac death. Conophylline (CNP) belongs to the class of vinca alkaloids; it is characterized with pronounced anti-fibrotic effect demonstrated on several fibrosis models. The mode of antifibrotic action of CNP is unknown. The present study focuses on examination of the effects and mode of action of CNP in different concentrations in original model of MF in vitro developed by the treatment of cardiac fibroblasts isolated form the hearts of the newborn rats with angiotensin II (Ang II). The study assessed viability, collagen content, and related protein expression in cardiac fibroblasts employing MTT-test, Sircol assay, and western blot, respectively. CNP markedly protected the cultured cells against the development of Ang II-induced fibrosis, which was indicated by diminished viability of fibroblasts, decreased collagen, and down-regulated expression of α-smooth muscle actin (α-SMA). CNP did not affect TGF-β pathway altered by Ang II, but markedly decreased the level of bone morphogenetic protein-4 (BMP4) enhanced by Ang II and BMP4 itself. CNP produced no effect on phosphorylation level of α-SMA and MAD homologue-1/5/8, the classic BMP4 downstream pathway elements, but attenuated the level of c-Jun N-terminal kinase (JNK) elevated by BMP4. CNP did not inhibit the development of MF in the presence of JNK activator anisomycin. Thus, CNP inhibited Ang II-provoked MF via BMP4/JNK pathway.