Представлен новый способ иммуноблоттинга для простой, быстрой и высокочувствительной детекции белков. Электрофоретическое разделение образца проводят в неденатурирующих условиях в тонком проводящем слое между целлюлозными мембранами в отсутствие ПААГ. Поверхность мембраны предварительно модифицируют азидофенильными группами для фотохимической иммобилизации белков in situ. Белковые полосы визуализируют путём обработки мембраны магнитными частицами, покрытыми специфическими антителами, и последующего удаления несвязавшихся частиц с помощью магнита. Предел обнаружения в модельной системе с биотинилированным БСА и магнитными частицами, покрытыми стрептавидином, достигает 10 фг, или около 10⁵ молекул при общем времени анализа около 5 мин. Данный метод был использован для обнаружения IgA в образце выдыхаемого человеком воздуха. Разработанный метод может быть полезен при анализе различных сложных биологических образцов, содержащих низкие количества аналита.

The article presents a new method of immunoblotting for simple, rapid, and highly sensitive detection of proteins. Electrophoretic separation of sample is carried out under non-denaturing conditions in a thin conductive layer between cellulose membranes in the absence of polyacrylamide gel. The membrane surface is preliminarily modified with azidophenyl groups to photochemically immobilize proteins in situ. Protein bands are visualized by treating the membrane with magnetic beads coated with specific antibodies, and then removing the unbound particles with a magnet. The detection limit in the model system with biotinylated BSA and magnetic beads coated with streptavidin reaches 10 fg or about 10⁵ molecules, while the total blotting time does not exceed five minutes. The application of the method is demonstrated by the detection of IgA in a sample of human exhaled breath. The method may be useful for the analysis of various complex biological samples containing low amounts of analyte.