Биофизика и биохимия
Оценка активности сукцинатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы в лимфоцитах крови у якутских сусликов Spermophilus undulatus при гибернации и в активном состоянии
Исследовали энергетический обмен в лимфоцитах крови якутских сусликов Spermophilus undulatus в состояниях активности и зимней спячки. Активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) — маркерных ферментов дыхания митохондрий и гликолиза — измеряли цитобиохимическим методом, основанным на количественной оценке продукта реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ) диформазана в иммобилизованных на стекле лимфоцитах крови. Для измерения активности СДГ и ЛДГ проводили цитобиохимическое окрашивание иммобилизованных клеток с сукцинатом и лактатом и NAD. В состоянии гибернации активность СДГ снижалась в 3 раза, активность ЛДГ — в 10 раз и более. Полученные результаты показывают, что в лимфоцитах сусликов снижение метаболической активности в состоянии гипотермии в большей степени связано с ингибированием гликолиза, чем с митохондриальным энергообеспечением.
nkhunderyakova@gmail.com Хундерякова Н.В.
Evaluation of succinate and lactate dehydrogenase activities in blood lymphocytes in Yakut ground squirrels Spermophilus undulatus in winter-torpid and active states
An investigation of the energy metabolism of blood lymphocytes in yakut ground squirrels Spermophilus undulatus in active and winter torpid states has been undertaken. The activities of the mitochondrial and glucolytic marker enzymes, succinate dehydrogenase (SDH), and, lactate dehydrogenase (LDH), were estimated by CytoBioChemical method (CBCh) based on quantitative evaluation of diformazan precipitate following the reduction of the nitroblue tetrasolium (NBT) by glass-adhered blood lymphocytes. In order to measure the activities of SDH and LDH, immobilized cells were stained with succinate, lactate and NAD. In a winter-torpid state, the SDH activity decreased 3-fold, the decline in LDH activity was 10-fold and greater. Our results show that a decrease in metabolic activity in lymphocytes of ground squirrels in the state of hypothermia is associated with the inhibition of glycolysis rather than mitochondrial energy metabolism.