Технология SmartFlare позволяет определять мРНК в живых клетках на уровне отдельных клеток. Изучена возможность детекции малых субпопуляций CD4⁺-лимфоцитов с помощью нанозондов SmartFlare. Показано, что технология SmartFlare позволяет выявлять мРНК транскрипционных мастер-регуляторов основных субпопуляций CD4⁺ Т-хелперов в живых лимфоцитах человека. Нанозонды, меченные флюорофором Су5, лучше детектируются на проточных цитометрах по сравнению с Су3. Оптимальным временем инкубации лимфоцитов с зондами SmartFlare следует считать 24 ч.

A relevant question of applied and clinical immunology is design of new approaches for immunological indicators identifying. It allows obtaining a complete picture of the immune response in patients to treat them efficiently. A SmartFlare method is based on detection of mRNA inside single living cells. The aim of the study is investigation of the opportunity of SmartFlare applying to detect small subsets of CD4⁺ T-lymphocytes. It has been revealed that SmartFlare allows detecting transcriptional master regulators of major CD4⁺ T-helper subsets at mRNA level inside living human lymphocytes. The nanoprobes conjugated with Cy5 are more detectable in comparison with Cy3 using flow cytometry. Appropriate time of lymphocytes incubation with SmartFlare probes is 24 hours.