Содержание и архив номеров
2019 г., Том 167, № 3 МАРТ
Биофизика и биохимия
Получение рекомбинантного трансферрина человека в эукариотической системе экспрессии Pichia pastoris
Одной из важнейших отраслей биотехнологии является разработка и производство бессывороточных культуральных сред, позволяющих значительно снизить стоимость получаемых препаратов и обеспечивающих стандартизацию биотехнологического производства. Замена белковых составляющих в бессывороточных питательных средах рекомбинантными аналогами позволит избавиться от риска контаминации различными инфекционными агентами. В качестве одного из белковых составляющих бессывороточных сред, отвечающего за транспорт ионов Fe3+ внутрь клетки, используют трансферрин человека. Нами получен штамм-продуцент P. pastoris, секретирующий трансферрин человека в культуральную среду. Показано, что максимальный уровень экспрессии трансферрина 20 мг/л достигается при использовании конститутивного GAP-промотора и поддержании рН среды на уровне 6.5.
Ключевые слова: трансферрин человека, бессывороточные среды, система экспрессии Pichia pastoris
Адрес для корреспонденции: bobik_tanya@mail.ru Бобик Т.В.
Production of recombinant human transferrin in eukaryotic Pichia pastoris expression system
The development and manufacturing of serum-free culture media allowing reducing the costs of preparations and standardizing the biotechnological process are important trends in biotechnology. Substitution of protein compounds in the serum-free media with recombinant analogues reduces the risk of contamination with various infectious agents. Human transferrin is a protein component of serum-free media responsible for the transport of Fe3+ ions into cells. We generated a producing strain P. pastoris secreting human transferrin to the culture medium. The use of constitutive GAP promoter and maintenance of medium pH at 6.5 allows attaining maximum level of transferrin expression (20 mg/liter).
Key Words: human transferring; serum-free media; Pichia pastoris expression system