Биотехнологии
Получение протеолитических биокатализаторов высокой специфичности с помощью скрининговых технологий
Предложена система скрининга библиотек протеолитических ферментов в формате дрожжевого дисплея с использованием адсорбирующегося на поверхности клеток дрожжей субстратного белка, содержащего последовательность сайта расщепления целевой протеиназы. Специфическое расщепление субстратного белка высвобождает его биотинсвязывающий центр. Клетки, несущие целевую протеиназу, могут быть отобраны с помощью цитофлюориметрии за счет взаимодействия с биотинилированным флюоресцентным белком. На примере легкой цепи энтерокиназы человека показано, что разработанная система скрининга позволяет с высокой эффективностью отбирать протеолитические ферменты с заданной специфичностью.
bobik_tanya@mail.ru Бобик Т.В.