Содержание и архив номеров
2018 г., Том 165, № 3 МАРТ
Биотехнологии
Получение протеолитических биокатализаторов высокой специфичности с помощью скрининговых технологий
Предложена система скрининга библиотек протеолитических ферментов в формате дрожжевого дисплея с использованием адсорбирующегося на поверхности клеток дрожжей субстратного белка, содержащего последовательность сайта расщепления целевой протеиназы. Специфическое расщепление субстратного белка высвобождает его биотинсвязывающий центр. Клетки, несущие целевую протеиназу, могут быть отобраны с помощью цитофлюориметрии за счет взаимодействия с биотинилированным флюоресцентным белком. На примере легкой цепи энтерокиназы человека показано, что разработанная система скрининга позволяет с высокой эффективностью отбирать протеолитические ферменты с заданной специфичностью.
Ключевые слова: скрининг протеолитических ферментов медицинского назначения, дрожжевой дисплей, система экспрессии Pichia pastoris
Адрес для корреспонденции: bobik_tanya@mail.ru Бобик Т.В.