Методики
Определение мембранного потенциала митохондрий в лейкоцитарной взвеси методом флюоресцентной спектроскопии258
Описан метод определения мембранного потенциала митохондрий в изолированной лейкоцитарной взвеси с использованием чувствительного флюоресцентного катион–активного красителя 5,5',6,6'–тетрахлоро–1,1',3,3'–йодид тетраэтилбензимидазолилкарбоцианина (JC–1) и спектрофотометрии. JC–1–мономер быстро проникает через митохондриальную мембрану живой клетки, в результате чего внутри митохондрий формируются JC–1–агрегаты, характеризующиеся красным спектральным свечением (λ=585 нм). При деполяризации митохондриальной мембраны, являющейся ранним признаком апоптоза, JC–1 не накапливается внутри митохондрий и находится в цитоплазме в виде мономерной формы, которая характеризуется зеленым спектральным свечением (λ=510 нм). Предложенная методика позволяет оценить функциональное состояние клеток организма и исследовать механизмы регуляции энергетического обмена путем определения мембранного потенциала митохондрий.
vfdnz_nch@mail.ru Кондратьева Е.В.