Методики
Метод визуализации липидных наночастиц на ультратонких срезах в просвечивающем электронном микроскопе
Предложены три варианта обработки образцов, содержащих липидные наночастицы (ЛНЧ) состава: ЛНЧ-1 (яичный фосфатилидхолин/1,2-диолеил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин/2-[[4-додециламино-6-олеиламино-1,3,5-триазин-2-ил]-(2-гидроксиэтил))амино]этанол и ЛНЧ-2 (яичный фосфатилидхолин/фосфатидная кислота/холестерин). Обработка обеспечивала визуализацию ЛНЧ на ультратонких срезах клеток SC1-R780 и осадков ЛНЧ и включала фиксацию смесью (или раздельно) 2,5 % глутаральдегида и 0,75 % танина, обезвоживание растворами С2Н5ОН или ацетона. Адекватность обработки ЛНЧ оценивали по соответствию структуры на срезах структуре при негативном контрастировании. Фиксация раздельно глутаральдегидом и танином с обезвоживанием в ацетоне обеспечивала наиболее адекватную сохранность ультраструктуры обоих типов ЛНЧ.
lenryab@yandex.ru Рябчикова Е.И.
10.47056/0365-9615-2026-182-10-340-345 EDN: XOKWUE
A method for visualizing lipid nanoparticles in ultrathin sections using a transmission electron microscope
Three sample preparation methods are evaluated for samples containing lipid nanoparticles (LNPs) with the following compositions: LNP-1 (egg phosphatidylcholine/1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine/2-[[4-dodecylamino-6-oleoylamino-1,3,5-triazin-2-yl]-(2-hydroxyethyl))amino]ethanol) and LNP-2 (egg phosphatidylcholine/phosphatidic acid/cholesterol). The processing method enabled visualization of LNPs in ultrathin sections of SC1-R780 cells and pelleted LNP; it involved fixation — either simultaneously using a mixture or sequentially — with 2.5 % glutaraldehyde and 0.75 % tannin, followed by dehydration using ethanol or acetone solutions. The adequacy of the LNP processing was assessed by comparing the structure observed in sections with that seen via negative staining. Sequential fixation with glutaraldehyde and tannin, combined with dehydration in acetone, ensured the optimal preservation of the ultrastructure for both types of LNPs.